Si tratta dell’affresco centrale della Stanza della notte e del dì, realizzato da Jacopo Vignali nel 1525. Entro una forma ottagonale, circondata dagli stemmi della famiglia Buonarroti, il Padre Eterno, connotato da un ampio manto e da una fluente barba bianca, è colto nell’atto di separare la luce del giorno dalle tenebre della notte, rappresentate come due cortine che vengono scostate verso le estremità.