In pendant con l’allegoria del Giorno, nel riquadro destro del soffitto della Camera della notte e del dì, Vignali realizzò l’allegoria della Notte. In un cielo plumbeo denso di nuvole, la figura della Notte, tratta dal medesimo soggetto michelangiolesco della Sagrestia Nuova, si staglia all’interno del cerchio sottile di una falce di luna.