Esta carta universal realizada en pergamino es un facsímil del original conservado en la Hispanic Society de Nueva York. En el margen superior izquierdo aparece firmada junto al escudo del águila bicéfala y dice: “Jû Vespuci, piloto de su Magestad me fecti en Sevilla Ño 1526”. La presencia del águila bicéfala en referencia al emperador Carlos V y la riqueza de la carta hace suponer a algunos historiadores que podría tratarse de un regalo por la boda entre el emperador e Isabel de Portugal.
Los continentes aparecen representados con diversos elementos anecdóticos como animales, ciudades representativas y montañas. El continente sudamericano contiene menos topónimos tiene menos información que en América Central y del Norte. En estas costas aparecen representados indios desnudos en escenas de la vida diaria. La apariencia de la península de Yucatán refleja el conocimiento geográfico que poseía Juan Vespucio sobre el viaje de Cortés de 1524, el reflejo del Estrecho de Magallanes con la inscripción “estrecho de Santón que descubrió Hernando de Magallanes” o el reflejo de la descubierta ciudad de México- Tenochtitlán (1521).
La carta fue realizada en el marco de la Casa de la Contratación de Sevilla, creada por los Reyes Católicos en 1503. Fue fundada con el fin de controlar todo lo relativo al Nuevo Mundo. Uno de los aspectos que controlaba era la organización de la parte científica, la construcción de instrumentos de navegación y la realización de documentos cartográficos. Estas empresas estaban gestionadas por el Piloto Mayor, a cuyo cargo también estaban la preparación y ejecución de expediciones. Este cargo debía estar ocupado por un navegante con capacidad para trazar cartas náuticas y mapas para incorporarlos al padrón real. Este cargo lo ocupó Américo Vespuccio y posteriormente su sobrino Giovanni Vespuccio desde 1512.
Giovanni participó en diversos viajes y participó en la comisión para la demarcación que debía trasladar todo lo acordado entre España y Portugal en el Tratado de Tordesillas sobre el reparto de territorios del Nuevo Mundo. Acusado de espionaje en favor de los Medici fue apartado de sus funciones como cartógrafo.